用ELISA法挑選ELISA測試盒

怎樣靈活應(yīng)用ELISA這個檢測方法以及怎樣去挑選ELISA測試盒。ELISA這個方法的原理，大家都很明白，網(wǎng)上的資料很多。可真正用起來的時候，偶然間就會有點(diǎn)犯糊涂，我談一下自己的理解。

1、ELISA檢測方法簡單，靈敏度高，我個人認(rèn)為ELISA檢測血清或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測；病原體抗原的定性與定量；評估自己制備的血清抗體的效價等。很多客戶有個誤區(qū)，拿來一個指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測，我還是建議多動腦，該檢測活性的檢測活性，該做western的做western。
2、對付一些小分子的檢測，例如：前線腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測，我的理解是要用競爭法ELISA去檢測，也要購買采用這個方法的盒試劑盒。ELISA試劑盒一般細(xì)胞因子的檢測，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測，由于因子分子量比力大，一般10幾個KD左右，很容易找到兩個或多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不通的表位，也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗，每個孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子，然后加樣品，再加不帶標(biāo)志的檢測抗體，顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高，吸光度越低。
 
3、有些客戶會用OVA（卵清卵白）做一些哮喘，過敏性腸炎的模型，然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG，IgE等指標(biāo)。
4、NO的檢測，一般都是采用經(jīng)典的Greiss法，如今市場上竟然有NO ELISA試劑盒，真是徹夜未眠也搞不明白。另外還有做氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA的檢測，我推薦ELISA測試盒。